人的加入，那种“走了二十五英里却什么也没有干成”的情况就会越来越少了。
随着欧洲人的到来，大印第安战道的通行条件也得到了改善。
一些关键地段得以扩宽，沿途甚至还建设了一些据点。
很多路段被命了名，并被标注在地图上，一些岔路口也有了路标，不再会出现需要通过进行临时的“艺术创作”来标明路线的情况。
然而，印第安人和欧洲人之间的蜜月期来得快，去得也快。
印第安人和零散的欧洲人的单纯贸易关系，随着欧洲殖民者的大规模登陆而告一段落。
双方从贸易伙伴，逐渐变成竞争对手甚至致命威胁。
以波华坦为首的弗吉尼亚诸部，和英国殖民者接触时间最早。
詹姆斯敦建立后，为了应对英国人与日俱增的威胁，波华坦人和臣属于他们的其它部落组成了波华坦联盟，在17世纪前期和英国人进行了盎格鲁-波华坦战争。
这场战争从1610年持续到1646年，，双方长期处于敌对状态。
在同英国人作战期间，大印第安战道成了原住民的大动脉。
他们沿着这些岔路极多的崎岖小径行军，神出鬼没，常常让美洲大陆的“新人”英国人措手不及。
其中在1622年，还发生了弗吉尼亚大屠杀事件：波华坦部的战士出人意料地绕过负责防守的英军主力，袭击了詹姆斯河沿岸的几个英国人村落和矿场，杀死了四分之一的英国人。
正因如此，这条小径被也被命名为“大印第安战争之路”。
后来，英国人展开报复，对波华坦部发动了一轮轮攻势。
最终，这场旷日持久的战争以双方的妥协告一段落。
但从此以后，波华坦部也元气大伤，最后联盟瓦解，部众分散到了东海岸的各地。
其余的印第安人部落也相继受到了欧洲人的影响。
法国人甚至利用大印第安战道，由德农维尔侯爵（新法兰西政客将军，当时法国殖民地的二把手）率领军队，在各部易洛魁人之间迂回穿插，深入到了易洛魁联盟的腹地，建立了德农维尔堡（今纽约州的尼亚加拉堡）。
德农维尔侯爵利用这个据点，和易洛魁人周旋对抗，还在一次冲突中俘获了数十名易洛魁人的领袖，并将他们送回法国马赛去当苦工。
由此，法国人把势力范围扩展到了五大湖南岸，对英国殖民地形成了军事上的牵制。
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